Protein Konsentrasjonskalkulator

Kategori: Biologi
- november 17, 2025
| |
Typiske verdier varierer fra 0.5 til 2.0
Standard cuvetter har en bredde på 1 cm
Hvis prøven ble fortynnet før måling (f.eks., 5 = 1:5 fortynning)

Konsentrasjonen av protein ved bruk av absorbans ved 280 nm (A280) bestemmes ved hjelp av Beer-Lambert-loven:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

hvor:

  • \( C \) = Proteinkonsentrasjon (mg/mL)
  • \( A \) = Absorbans ved 280 nm
  • \( \epsilon \) = Ekstinksjonskoeffisient (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Banelengde på kuvette (cm)

Hva er Protein Concentration Calculator?

Protein Concentration Calculator hjelper med å bestemme proteinkonsentrasjon ved bruk av ulike metoder, inkludert:

  • Absorbans ved 280 nm (A280): En rask og ikke-destruktiv metode basert på aromatiske aminosyrer.
  • Bradford-metoden: En kolorimetrisk metode som bruker fargebinding.
  • BCA (Bicinchoninic Acid) Assay: En metode som baserer seg på kobberreduksjon og kolorimetrisk deteksjon.
  • Lowry-metoden: En veletablert tilnærming som bruker protein-kobber-interaksjoner.

Hvordan bruke kalkulatoren

Følg disse trinnene for å beregne proteinkonsentrasjon:

  • Velg målemetode (A280, Bradford, BCA eller Lowry).
  • Angi nødvendige verdier som absorbans, fortynningsfaktor og ekstinksjonskoeffisient (hvis nødvendig).
  • Hvis du bruker en standardkurvemetode (Bradford, BCA eller Lowry), legg inn kurveparametrene.
  • Klikk på "Beregn"-knappen for å få konsentrasjonsresultatet.

Fordeler med å bruke kalkulatoren

  • Sparer tid ved å automatisere konsentrasjonsberegninger.
  • Støtter flere målemetoder for fleksibilitet.
  • Inkluderer en fortynningskalkulator for å lage spesifikke konsentrasjoner.
  • Reduserer menneskelige feil i manuelle beregninger.

Vanlige spørsmål

1. Hvor nøyaktig er Absorbans (A280)-metoden?

A280-metoden er generelt nøyaktig for rene proteiner, men kan påvirkes av forurensninger som nukleinsyrer.

2. Kan jeg bruke Bradford-metoden for alle proteiner?

Bradford-metoden fungerer godt for de fleste proteiner, men kan gi varierende resultater avhengig av proteinkomposisjonen.

3. Hva er fordelen med BCA-metoden?

BCA-metoden er mer kompatibel med detergenter og har et bredere lineært område enn Bradford.

4. Hvordan velger jeg riktig ekstinksjonskoeffisient for A280?

Bruk publiserte verdier for kjente proteiner, eller beregn ekstinksjonskoeffisienten basert på aminosyresammensetning.

5. Hvorfor trenger jeg en fortynningsfaktor?

Hvis prøven din er fortynnet før måling, må du multiplisere den beregnede konsentrasjonen med fortynningsfaktoren for å få riktig sluttkonsentrasjon.